1.2.5 鉴别
(1)取本品内容物9g,研细,加甲醇50mL,超声处理30min,滤过,滤液蒸干,残渣加水30mL使溶解,用水饱和的正丁醇提取2次,每次30mL,合并正丁醇液;加氨试液三倍量,摇匀,放置分层,取正丁醇液蒸干,残渣加甲醇1mL使溶解,作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品,加甲醇制成每1mL含1mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中华人民共和国药典(2015年版)》,以下简称《中国药典》2015年版一部附录Ⅵ B)实验,吸取供试品溶液5μL、对照品溶液2μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶液为展开剂,展开、取出、晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。置紫外光灯(365nm)下检视,显相同颜色的荧光斑点。
(2)取本品内容物6g,研细,加浓氨试液3mL及三氯甲烷40mL,摇匀,放置1h,超声处理30min,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1mL使溶解,作为供试品溶液。另取延胡索对照药材2g,加甲醇50mL,浸泡过夜,同法制成对照药材溶液。再取延胡索乙素对照品,加甲醇溶解,制成每1mL含1mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2015年版附录Ⅵ B)实验,吸取上述两种溶液各5~10μL,分别点于同一用1% 氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上,以正己烷-三氯甲烷-甲醇(7.5∶4∶1)为展开剂,置以展开剂预饱和的展开缸内,展开、取出、晾干,置碘蒸气中熏至斑点清晰,取出,挥尽板上吸附的碘后,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
(3)取本品内容物6g,研细,加甲醇40mL,超声处理30min,滤过,滤液蒸干,残渣加水20mL使溶解,用乙醚振摇提取2次,每次25mL,弃去乙醚液。水液加盐酸调节pH值至2~3,用乙醚25mL提取,弃去乙醚液,水液用乙酸乙酯振摇提取2次,每次25mL,合并乙酸乙酯液,用水30mL洗涤,乙酸乙酯液蒸干,残渣加甲醇1mL使溶解,作为供试品溶液。另取白术对照药材2g,加甲醇30mL,超声处理30min,滤过,滤液蒸干,残渣加水20mL使溶解,用乙酸乙酯振摇提取2次,每次25mL,合并乙酸乙酯液,蒸干,残渣加甲醇1mL使溶解,作为对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2015年版附录Ⅵ B)实验,吸取上述两种溶液各10μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-丙酮-甲酸(19∶1∶0.1)为展开剂,展开、取出、晾干,喷以2%氢氧化钠溶液,在紫外光(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
(4)取丹参对照药材2g,加盐酸溶液(1→50)25mL,加热回流1h,滤过,滤液用乙酸乙酯振摇提取2次,每次25mL,合并乙酸乙酯液,蒸干,残渣加甲醇1mL使溶解,作为对照药材溶液。另取丹参素钠对照品,加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2015年版附录Ⅵ B)实验,吸取(3)项下的供试品溶液及上述对照药材溶液各2~5μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(8∶5∶2)为展开剂,展开、取出、晾干,置氨蒸气中熏15min,在紫外光(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱和对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
(5)取本品内容物6g,研细,加甲醇40mL,超声处理30min,滤过,滤液蒸干,残渣加水20mL使溶解,用乙酸乙酯振摇提取2次,每次25mL,合并乙酸乙酯液,蒸干,残渣加甲醇1mL使溶解,作为供试品溶液。另取当归对照药材1g,加水50mL,煎煮1h,滤过,滤液用乙酸乙酯振摇提取2次,每次25mL,合并乙酸乙酯液,蒸干,残渣加甲醇1mL使溶解,作为对照药材溶液。再取阿魏酸对照品,加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2015年版附录ⅥB)实验,吸取供试品溶液10μL、对照品溶液和对照药材溶液各5~10μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20∶10∶1)为展开剂,展开、取出、晾干,喷以1%铁氰化钾溶液与1%三氯化铁溶液等体积的混合溶液(临用前配制)。供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(6)取本品内容物6g,研细,加80%丙酮100mL,超声处理30min,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1mL使溶解,作为供试品溶液。另取鸡血藤对照药材2g,加80%丙酮40mL,同法制成对照药材溶液。再取芒柄花素对照品,加甲醇制成每1mL含1mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2015年版附录Ⅵ B)实验,吸取上述三种溶液各5μL,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以三氯甲烷-甲醇(20∶1)为展开剂,展开、取出、晾干,在紫外光(254nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(7)取本品内容物6g,研细,加甲醇30mL,超声处理30min,滤过,滤液蒸干,残渣加水20mL使溶解,再加盐酸1mL,加热回流1h,立即冷却,加三氯甲烷振摇提取2次,每次25mL,合并三氯甲烷液,蒸干,残渣加甲醇1mL使溶解,作为供试品溶液。另取山药对照药材2g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2015年版附录Ⅵ B)实验,吸取上述两种溶液各5μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-丙酮(9∶1)为展开剂,展开、取出、晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。