人体寄生虫学常用技术
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第二节 显微镜的使用

显微镜是人体寄生虫学实验的主要工具,学生必须在有关学科训练的基础上,按照统一操作规程,复习巩固低、高倍镜的使用方法,以便熟练掌握,并进一步在本学科实验过程中掌握油镜的使用方法。

一、显微镜的构造

显微镜由机械系统和光学系统两部分构成(图1-1)。

(一)机械系统

机械系统包括镜座、镜臂、载物台、压片夹、推进器、镜筒、物镜转换器、粗调焦螺旋、细调焦螺旋等。

(二)光学系统

光学系统包括反光镜、聚光器、光圈、目镜和物镜等。

图1-1 显微镜的构造示意图

二、显微镜的使用

(一)显微镜的拿取

必须一手紧握镜臂,一手平托镜座,防止碰撞及零件脱落。

(二)显微镜的常规检查

使用前,应检查显微镜零件有无缺损,调节器是否灵敏,镜头有无污点等。如有问题应及时报告老师。

(三)显微镜的放置

显微镜一般放在左胸前的桌上,距桌沿6~7cm。可将镜臂倾斜到适合自己操作和观察的角度,但注意不要过度倾斜,以免翻滚落地。使用液体装载的标本则需平放,不宜倾斜观察。

注意:课间休息离开座位时,应将显微镜竖直,并推向桌内,以免碰落。

(四)单目显微镜的观察姿势

端坐位,两眼同时睁开,左眼观察,左手调节螺旋,右手可移动标本或执笔绘图等。

(五)采光

用低倍镜采光,注意打开光圈、升高聚光器、将反光镜对向光源,一边用左眼经目镜观察,一边转动反光镜至视野光亮、均匀。

注意:观察虫卵标本时,低倍镜下光线要稍暗,光线太强不利于观察,可将聚光器下调;转高倍镜后,应适当升高聚光器,将光线调到合适亮度。

(六)观察玻片标本的规程

必须按照肉眼观察—低倍镜观察—高倍镜(或油镜)观察的顺序进行,不得违规操作。

1.肉眼观察 拿起标本对光观察标本的大小、染色及大致的位置或分布情况,以免在显微镜下找不到目标。

2.低倍镜观察 玻片向上将玻片放置于载物台上,用压片夹固定玻片,调节推进器将标本置于通光孔中央。转动粗准焦螺旋,使物镜接近玻片,然后用左眼对着目镜观察,转动粗准焦螺旋,使物镜慢慢离开玻片,直到出现清晰图像。此时,应移动标本,观察玻片全貌。然后,再通过调节细准焦螺旋重点观察需仔细观察的结构。

3.高倍镜观察 当细微的结构在低倍镜下不能完全分辨时,则换用高倍镜观察。但是,放大的倍数越大,所观察到的面积就越小,故不能过度依赖高倍镜,应视实际情况决定是否需要使用高倍镜。

用高倍镜观察时,需先在低倍镜下选择好需要放大的结构,并将其移至视野的中央,然后转换高倍镜。一般从低倍镜转至高倍镜时,只需稍稍调节细准焦螺旋即可使图像清晰。

如果用低倍镜观察时图像清晰,换高倍镜后重复几次调不出图像,则应检查玻片是否放置反了或者高倍镜镜头上是否有污物。

4.油镜观察 使用油镜时,应先在低倍镜下将所要观察的目标移至视野中央,聚光器升到最高以增强光亮度。在标本上滴一小滴镜油,从侧面仔细地注视着将油镜头缓缓转换过来并使镜头浸入镜油中,几乎与玻片相接触,但切勿使镜头直接碰压在玻片上,以免损坏镜头和标本。眼睛在目镜上观察时,徐徐向上旋转细准焦螺旋,直至物像清晰为止。

如果看不到所需观察的目标,应将镜头换回低倍镜,检查目标是否在视野中央,再按上述步骤操作。如仍不能看到目标,应认真思考,检查产生这一情况的原因(常见原因是玻片放反了),并寻找解决的方法。自己确实无法解决时,应报告老师,以便帮助解决。

使用油镜视野亮度增强,物像清晰,但是视野内观察到的标本面积比较小,一般很难观察标本整体。

(七)显微镜的收整

显微镜使用完毕,首先应取下标本,然后把倾斜的显微镜竖直,将物镜偏到两旁,并将镜筒下降到最低处,合好推进尺,检查各部件是否完好无缺。一手紧握镜臂,一手平托镜座,小心平稳地将显微镜放回原处,并在显微镜使用登记本上记录使用情况。

如使用过油镜,在放回显微镜前必须清洗油镜头和玻片。方法是用擦镜纸轻轻擦去镜头和玻片上的油滴,再换干净的擦镜纸滴上少许二甲苯,擦净镜头和玻片,最后再换干净的擦镜纸擦拭,直至干净为止。擦拭过程中动作应轻柔,可以让浸有二甲苯的擦镜纸停留在镜头或玻片上约半分钟,以便让二甲苯尽量地溶解掉镜头和玻片上的镜油。

三、显微镜的维护

(一)爱护显微镜

显微镜属精密仪器,为提高其使用寿命,应倍加爱惜,轻拿轻放,避免碰撞,防止零件脱落,严禁擅自拆卸显微镜零件。

(二)光学部分污染后的处理

光学部分污染后,应用擦镜纸仔细擦净(如有必要还应用擦镜纸浸湿二甲苯后进行擦拭清理)。严禁用口吹,严禁用手、手帕或其他干纸擦拭,以免损伤镜头。